Am 18. November geht "Joko & Klaas gegen ProSieben" in seine mittlerweile 16. Staffel. Immer mittwochs um 20:15 Uhr spielen die beiden dann gegen Gegnerinnen und Gegner, die von ihrem Sender ProSieben bestimmt werden. In den einzelnen Runden gilt es, sich Vorteile für die Finalrunde zu erkämpfen, in denen es dann um den Gewinn von 15 Minuten Sendezeit geht. Die dürften die beiden im Gewinn-Fall dann wieder donnerstags um 20:15 Uhr füllen. Verlieren sie, müssen sie sich den Wünschen ihres Senders beugen. Durch die Sendung führen wird wie üblich Steven Gätjen. Produziert wird das Format von Florida Entertainment.

Stellvertretend für ProSieben treten in dieser Staffel an: Schauspielerin Heike Makatsch, Musiker Rea Garvey, Schauspieler Nico Stank, Comedienne Tülin Sezgin (Conny.fromtheblock), Podcaster Tommi Schmitt, Moderatorin Laura Larsson, die Entertainer-Zwillinge Benni und Dennis Wolter, die Streamer Zarbex und HandOfBlood, die Schauspieler Elyas M'Barek und Wotan Wilke Möhring, Rennfahrerin Sophia Flörsch und der Musiker Wincent Weiss.

Des Weiteren sind Schauspieler Florian David Fitz und Schauspielerin Hannah Herzsprung, Musiker Nico Santos, Rapperin Badmómzjay, ":newstime"-Anchorwoman Karolin Kandler, Rapper Eko Fresh, Moderatorin Janin Ullmann, Schauspielerin Palina Rojinski, Moderator Riccardo Simonetti, Schauspielerin Alina Bock, TikTok-Creator Helge Mark und in einem Special die deutsche Handball-Nationalmannschaft. ProSieben wird damit schonmal auf die Handball-WM 2027 hinweisen, die der Sender übertragen wird.